好書(shū)推薦!《斑馬魚(yú)行為實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》電子版pdf,網(wǎng)盤(pán)發(fā)貨
斑馬魚(yú)游泳行為測(cè)試(swim behavior assay)主要用于在脊髓損傷或其他神經(jīng)系統(tǒng)損傷后的恢復(fù)過(guò)程中監(jiān)測(cè)斑馬魚(yú)游泳行為的變化,以評(píng)估損傷后的恢復(fù)情況和治療效果。分析斑馬魚(yú)在不同環(huán)境條件下的行為模式,了解其行為特征和可能的行為機(jī)制。研究斑馬魚(yú)游泳時(shí)肌肉的協(xié)調(diào)性,以及神經(jīng)系統(tǒng)如何控制這些肌肉的協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:使用5升的游泳隧道裝置。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:斑馬魚(yú)在無(wú)流動(dòng)的密閉隧道中適應(yīng)5分鐘。
通過(guò)觀察斑馬魚(yú)在不同流速下的游泳行為,評(píng)估它們的運(yùn)動(dòng)能力和耐力。
實(shí)驗(yàn)步驟:
每組5條斑馬魚(yú),在5升的游泳隧道裝置中。每組斑馬魚(yú)在接近零到低流速的條件下總共游泳15分鐘(0厘米/秒5分鐘,10厘米/秒5分鐘,以及15厘米/秒5分鐘)。整個(gè)游泳過(guò)程使用高速攝像機(jī)記錄,設(shè)置如下:寬高比1:4;像素時(shí)鐘344;幀率70幀/秒;曝光時(shí)間0.29秒;光圈1.4至2;最大幀數(shù)63,000。錄像被轉(zhuǎn)換為每秒20幀,對(duì)于每一幀,識(shí)別出大于1500像素平方的動(dòng)物/物體,并為每個(gè)動(dòng)物/物體導(dǎo)出XY坐標(biāo)。分析0、10和15厘米/秒的流速下游泳的距離。以9厘米/秒和10厘米/秒的速度游泳5分鐘,評(píng)估魚(yú)在最低速度下的游泳能力。每?jī)煞昼娫黾铀魉俣龋钡紧~(yú)達(dá)到疲勞極限。記錄每條魚(yú)疲勞時(shí)的游泳時(shí)間。
優(yōu)化斑馬魚(yú)游泳耐力測(cè)試條件:
確保測(cè)試環(huán)境的溫度適宜,通常斑馬魚(yú)的適宜水溫為26-28°C。水溫對(duì)斑馬魚(yú)的新陳代謝和行為有顯著影響。水溫的不適宜可能導(dǎo)致斑馬魚(yú)行為異常。
維持水質(zhì)的清潔,避免污染物或病原體影響測(cè)試結(jié)果。
不同年齡和發(fā)育階段的斑馬魚(yú)可能在游泳能力上存在差異。
根據(jù)斑馬魚(yú)的品種和健康狀況調(diào)整起始和增加的水流速度,確保測(cè)試既具有挑戰(zhàn)性又不至于造成過(guò)度壓力。水流速度的不適當(dāng)設(shè)置可能導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確,流速過(guò)快或過(guò)慢都可能影響斑馬魚(yú)的游泳表現(xiàn)。
在正式測(cè)試前給予斑馬魚(yú)足夠的時(shí)間適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境,減少因環(huán)境變化引起的壓力。實(shí)驗(yàn)室或測(cè)試環(huán)境中的噪音和振動(dòng)可能會(huì)干擾斑馬魚(yú)的行為。斑馬魚(yú)如果沒(méi)有足夠的時(shí)間適應(yīng)測(cè)試環(huán)境,可能會(huì)表現(xiàn)出壓力行為,影響游泳表現(xiàn)。
考慮斑馬魚(yú)的生理周期,避免在它們的休息期進(jìn)行測(cè)試。
確保斑馬魚(yú)在測(cè)試前得到充足的營(yíng)養(yǎng),處于良好的健康狀況。饑餓或過(guò)度喂養(yǎng)的斑馬魚(yú)可能表現(xiàn)出不同的游泳行為。生病或受傷的斑馬魚(yú)可能無(wú)法正常游泳,從而影響測(cè)試結(jié)果。
確保每次測(cè)試的條件保持一致,包括水溫、pH值、溶解氧水平等。水的pH值、溶解氧、氨氮水平和其他化學(xué)成分都會(huì)影響斑馬魚(yú)的健康和行為。光照的強(qiáng)度和周期可能會(huì)影響斑馬魚(yú)的生物節(jié)律和行為。
即使是相同年齡和大小的斑馬魚(yú),它們的個(gè)性和行為也可能存在差異。
參考文獻(xiàn):
Saraswathy, V.M., Zhou, L. & Mokalled, M.H. Single-cell analysis of innate spinal cord regeneration identifies intersecting modes of neuronal repair. Nat Commun 15, 6808 (2024). https://doi.org/10.1038/s41467-024-50628-y
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