本月 10 日,美國食品藥品監督管理局(FDA)宣布:計劃逐步取消單克隆抗體及其他藥物的動物實驗要求。使用包括人類細胞系、類器官以及 AI 等新方法等替代動物實驗,同時使用真實實驗數據確定藥物的有效性。
FDA 這項開創性舉措,旨在提高藥物安全性,加快評估流程,同時減少動物實驗,降低研發成本,并最終降低藥品價格。
在此之前,全球已有 40 多個國家已立法禁止化妝品動物測試,隨著對動物試驗的限制加劇,類器官、 3D 組織模型構建等技術快速發展,細胞培養小室(點此處申請試用)以其快速高效、真實模擬體內條件的優勢,廣泛獲得生物科研和醫學研究的青睞。
然而在實際操作中,你可能會遇到如下問題:
是該選擇半透明的 PC 膜還是高透明的 PET 膜,導致顯微鏡下觀察模糊或膜易撕裂;
選 0.4 μm 小孔徑而阻礙細胞穿透,共培養時又因孔徑過大引發非特異性穿透;
減血清培養中細胞死活貼不上膜、增殖緩慢或形態異常;
操作時頻繁挪動小室換液加藥,稍有不慎便污染細胞或破壞單層;
這些問題背后,隱藏著小室參數與實驗需求的錯配——從材質、孔徑到表面處理,唯有精準適配細胞特性與實驗目標,優化操作細節,才能突破嵌套培養的瓶頸,高效還原真實體內微環境!
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應用 BRAND Insert 2in1 嵌套培養小室重組人體表皮模型真實表現如何?數據來說話!
研究人員用 BRAND Insert 2in1 嵌套培養小室體系,培養并構建出 RhE,并對其進行檢測。結果顯示,成功構建的 RhE 模型在形態學、屏蔽功能檢測和體外腐蝕性測試實驗的檢測結果滿足標準,并且在體外腐蝕性測試實驗結果統計中表現出更小的標準偏差。
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形態學檢測
對 RhE 模型的橫截面進行 HE 染色,可以看到清晰的組織結構。
圖 1. 對在 BRAND Insert 2in1 嵌套培養小室(左)與某品牌小室(右)中培養的 RhE 模型進行 HE 染色,人源性角質形成細胞發育成了具有多層角質的結構。
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屏障功能檢測(EC50)
在 570 nm 波長下檢測出給定的時間里暴露于化學品的培養物平均存活率大于 50%,顯示 RhE 模型具有明顯的屏障功能。
圖 2. 用 MTT 法檢測暴露于 PBS 和 Triton X-100 的 RhE 模型活性。
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體外腐蝕性測試實驗
陰性對照測試比對結果顯示,在 BRAND Insert 2in1 嵌套培養小室與某品牌小室中培養的 RhE 模型存活率相近,并且由 BRAND Insert 2in1 嵌套培養小室建立的 RhE 模型存活率結果的數據標準偏差更小。
表 1. MTT 法檢測暴露于 PBS 的 RhE 模型活性
為了測試 RhE 模型是否可用于鑒別化學物質的潛在腐蝕性,將建立的 RhE 模型暴露在一組化學物質中 3 分鐘或 60 分鐘后,對其進行 MTT 檢測,并將檢測結果進行歸一化處理。結果顯示,暴露后,RhE 模型在非腐蝕性物質,如 4-(甲硫基)-苯甲醛中可以保持大于 50% 的活性,而在預評估為腐蝕性物質的甲酸、乳酸中以及陽性對照組實驗中的活性顯著降低。
圖 3. 不同化學物質的腐蝕性比較。NC,陰性對照。PC,陽性對照。
BRAND Insert 2in1 嵌套培養小室為何如此重要?
BRAND Insert 2in1 嵌套培養小室建立的 RhE 模型,具有良好的形態,清晰的組織結構,完整的屏障功能,可用于體外化學腐蝕性分析,并能帶來更穩定的檢測數據。現點擊下方圖片,可申請試用哦~
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站立 & 懸掛 2 種模式的 BRAND Insert 2 in 1 細胞培養小室
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支持懸掛 & 站立 2 種模式,兼容市面上大部分 ANSI/SLAS 規格的多孔培養板。通過掛鉤或底角三點固定,站立模式下透過膜與底面保持平行且留有 1 mm 距離,提供充足的細胞生長空間。
獨特的偏心設計讓加液、換液一步到位,無需移動小室,減少對細胞不必要的干擾,降低污染風險。
升級的 Cellgrade Plus 表面處理,除了必要的羧基和羰基外,膜表面還含有類蛋白成分,適用于減血清培養,讓培養條件苛刻的細胞更快貼壁、高效增殖。PET 膜的高透明度便于顯微觀察細胞狀態,PC 膜的孔密度提供更好的通透性。
內容策劃:潘成
內容審核:吳軍
題圖來源:圖蟲創意
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