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IP 條帶離家出走?這 5 個因素最容易被忽視,排查表拿走不謝

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科研日記 2025.03.27

重復了三次 IP 實驗,Input 條帶清晰,但 IP 組信號弱到看不見……得挨個排查,裂解液成分需要優化,但后期還會有抗體結合效率低、蛋白復合體解離、或者存在競爭性結合的問題,防不勝防啊。回想起來大師姐的 IP/Co-IP 幾乎次次成功,但她的 protocol 從來不讓人看,emmm,要不明天去偷一下試試(文末查看 IP 實驗信號弱的原因與解決方案)

在純化出高活性蛋白與捕獲真實互作信號等實戰中,科研人總是面臨許多難點:

如何避免 IgG 對照組與 IP 組同步出帶,證明特異性結合?

低豐度蛋白互作信號弱,怎樣提高富集效率?

IP 后 WB 檢測發現條帶位置偏移,是降解還是修飾導致?

如何根據目標蛋白的特性選擇標簽位置,維持互作特異性的同時提升純化效率?

如何通過洗脫條件調整維持蛋白的穩定性,避免純化過程中降解?

丁香園聯合IBA Lifesciences開展主題為「從案例解碼,蛋白互作核心方法 IP/Co-IP 技術精要與進階」的線上直播,結合蛋白純化關鍵策略,直擊蛋白互作方法 IP/Co-IP 實驗本質,從抗體選擇邏輯、樣本特異性優化到典型/異常條帶深度解析,通過真實案例拆解技術盲區,從純化到互作優化您的蛋白質研究。點擊下方小程序碼即刻報名,還有馬克杯、U盤、充電寶免費送~

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直播亮點搶先看

主題 1:輕松搞定蛋白純化與互作分析

本課程將深入解析 Strep-tag? 技術的基本原理和實際應用,重點討論蛋白質研究中的關鍵難題,例如如何選擇合適的表達系統、優化標簽位置以及調整洗脫條件。通過具體案例,結合 2024 年諾貝爾化學獎「計算蛋白質設計」背景,展示該技術在藥物篩選、抗體工程及酶動力學等領域的應用。課程還將指導如何根據蛋白質特性(如結構特點或修飾需求),從宿主選擇到分析方法優化,構建高效工作流程。

主題 2:從原理到案例:搞定蛋白互作核心方法 IP/Co-IP

本課程將系統解析 IP/Co-IP 技術在蛋白互作研究中的核心原理與應用邏輯,從該方法在機制驗證中的不可替代性切入,深入探討在實驗中如何規避非特異性干擾等問題,并針對細胞、組織、血清等不同樣本類型定制裂解與富集策略。同時課程將結合典型結果與特殊案例解讀,剖析實驗中遇到的疑難雜癥。

以下是偷拍到的大師姐實驗筆記,大家可以悄悄收藏~

IP 實驗信號弱的原因與解決方案


本次直播更有線上解答環節,你可以有和講師一對一的答疑機會!更多干貨內容歡迎點擊下方海報報名直播~

內容策劃:王丹琦

內容審核:朱超敏

題圖來源:丁香實驗

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