科研日記 2025.03.27

重復了三次 IP 實驗，Input 條帶清晰，但 IP 組信號弱到看不見……得挨個排查，裂解液成分需要優化，但后期還會有抗體結合效率低、蛋白復合體解離、或者存在競爭性結合的問題，防不勝防啊。回想起來大師姐的 IP/Co-IP 幾乎次次成功，但她的 protocol 從來不讓人看，emmm，要不明天去偷一下試試（文末查看 IP 實驗信號弱的原因與解決方案）

在純化出高活性蛋白與捕獲真實互作信號等實戰中，科研人總是面臨許多難點：

如何避免 IgG 對照組與 IP 組同步出帶，證明特異性結合？

低豐度蛋白互作信號弱，怎樣提高富集效率？

IP 后 WB 檢測發現條帶位置偏移，是降解還是修飾導致？

如何根據目標蛋白的特性選擇標簽位置，維持互作特異性的同時提升純化效率？

如何通過洗脫條件調整維持蛋白的穩定性，避免純化過程中降解？

丁香園聯合IBA Lifesciences開展主題為「從案例解碼，蛋白互作核心方法 IP/Co-IP 技術精要與進階」的線上直播，結合蛋白純化關鍵策略，直擊蛋白互作方法 IP/Co-IP 實驗本質，從抗體選擇邏輯、樣本特異性優化到典型/異常條帶深度解析，通過真實案例拆解技術盲區，從純化到互作優化您的蛋白質研究。點擊下方小程序碼即刻報名，還有馬克杯、U盤、充電寶免費送～

?
?

直播亮點搶先看

主題 1：輕松搞定蛋白純化與互作分析

本課程將深入解析 Strep-tag? 技術的基本原理和實際應用，重點討論蛋白質研究中的關鍵難題，例如如何選擇合適的表達系統、優化標簽位置以及調整洗脫條件。通過具體案例，結合 2024 年諾貝爾化學獎「計算蛋白質設計」背景，展示該技術在藥物篩選、抗體工程及酶動力學等領域的應用。課程還將指導如何根據蛋白質特性（如結構特點或修飾需求），從宿主選擇到分析方法優化，構建高效工作流程。

主題 2：從原理到案例：搞定蛋白互作核心方法 IP/Co-IP

本課程將系統解析 IP/Co-IP 技術在蛋白互作研究中的核心原理與應用邏輯，從該方法在機制驗證中的不可替代性切入，深入探討在實驗中如何規避非特異性干擾等問題，并針對細胞、組織、血清等不同樣本類型定制裂解與富集策略。同時課程將結合典型結果與特殊案例解讀，剖析實驗中遇到的疑難雜癥。

以下是偷拍到的大師姐實驗筆記，大家可以悄悄收藏～

IP 實驗信號弱的原因與解決方案

本次直播更有線上解答環節，你可以有和講師一對一的答疑機會！更多干貨內容歡迎點擊下方海報報名直播～

內容策劃：王丹琦

內容審核：朱超敏

題圖來源：丁香實驗