近日，東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科主任吳國(guó)球教授團(tuán)隊(duì)，在美國(guó)化學(xué)會(huì)分析化學(xué)領(lǐng)域權(quán)威期刊 Analytical chemistry（《分析化學(xué)》）（中科院一區(qū)Top期刊）發(fā)表了題為“Dual-OR Logic-Gated Lateral Flow Strip Assay Based on Colorimetric-Fluorescence Dual Indication for Screening of HPV16/18 in Multiple Scenarios（基于比色-熒光雙指示的雙OR邏輯門控側(cè)流層析試紙條用于多場(chǎng)景下HPV16/18篩查）”的研究成果，該研究將三分支催化發(fā)夾組裝介導(dǎo)的信號(hào)放大技術(shù)與基于簡(jiǎn)單OR邏輯門的信號(hào)輸出相結(jié)合，開發(fā)了一種基于雙OR邏輯門的三線側(cè)流條帶檢測(cè)系統(tǒng)，成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)HPV 16/18的高靈敏度鑒定，為探索邏輯門在臨床檢測(cè)中的應(yīng)用提供了思路。東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科吳國(guó)球教授為第一通訊作者，東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士研究生王繼瑋為論文第一作者。

宮頸癌是一種惡性疾病，在欠發(fā)達(dá)地區(qū)由于人類乳頭瘤病毒（HPV）疫苗接種不普及以及缺乏完善的篩查計(jì)劃，宮頸癌的發(fā)病率和死亡率不斷上升。篩查系統(tǒng)的改進(jìn)主要涉及 HPV 感染的檢測(cè)，包括血清學(xué)檢測(cè)、混合捕獲技術(shù)、qPCR 技術(shù)和 Cervista 檢測(cè)方法等。其中，qPCR 是最常用的 HPV 感染檢測(cè)方法，但諸多因素限制了其在篩查中的廣泛應(yīng)用。此外，HPV篩查過(guò)程中的自我采樣可為參與篩查項(xiàng)目的婦女提供更多隱私保護(hù)，有利于篩查的廣泛開展。因此，開發(fā)一種簡(jiǎn)便且可在現(xiàn)場(chǎng)拆卸的HPV 快速檢測(cè)系統(tǒng)既有意義又有必要。

圖 1：（A）用于檢測(cè)臨床樣本的三線側(cè)流條帶操作流程；（B）目標(biāo)觸發(fā)報(bào)告器組裝的示意圖；（C）三線側(cè)流條帶結(jié)構(gòu)圖及其 OR 邏輯門讀取模式圖。

鑒于HPV病毒的保守序列通常具有復(fù)雜的高級(jí)結(jié)構(gòu)，靶序列很可能被掩蓋；以及臨床樣本中的大量夾雜物對(duì)探針觸發(fā)概率的影響。我們將OR邏輯門的概念運(yùn)用到檢測(cè)的方法學(xué)中，通過(guò)OR 邏輯門的多靶位識(shí)別-合并信號(hào)輸出來(lái)提高陽(yáng)性樣本的檢測(cè)率。與RT-PCR方法相比，該方法無(wú)需核酸提取等前處理，反應(yīng)速度快，樣品制備簡(jiǎn)單，通量潛力大，對(duì)設(shè)備的依賴性低，有利于受試者的自我檢測(cè)和基層醫(yī)療單位的大規(guī)模篩查。其靈敏度和特異性均超過(guò) 95%，檢測(cè)時(shí)間縮短至 30 分鐘。

圖 2.熒光側(cè)向流試紙條的檢測(cè)性能評(píng)估。(A，D）不同濃度的 HPV18 mRNA或 HPV16 mRNA在熒光側(cè)向流試紙中的熒光可見度；（B，E）對(duì)應(yīng)的熒光強(qiáng)度；（C、F）熒光側(cè)向流試紙檢測(cè) HPV18 mRNA或 HPV16 mRNA的熒光強(qiáng)度與目標(biāo)濃度對(duì)數(shù)之間的線性關(guān)系；（G）熒光側(cè)向流試紙的特異性評(píng)估；（H、I）熒光側(cè)向流試紙的可重復(fù)性評(píng)估；（J）基于 “OR ”邏輯門的 TCHA-FLFIA 輸出可視化。a ~ e 點(diǎn)的輸入真值：blank、（0,0,0,0）、（1,1,0 ,0）、（0,0,1,1）、（1,1,1,1）。

該方法是一套適應(yīng)不同使用場(chǎng)景的側(cè)向流檢測(cè)系統(tǒng)，它補(bǔ)充了現(xiàn)有的HPV快速篩查方法，為宮頸癌預(yù)防提供了更多可能。（編輯王倩 校對(duì)劉敏 編審程守勤）