對HER2低表達乳腺癌進行IHC檢測，旨在評估觀察者間的一致性，并分析其與數(shù)字成像的相關性。

隨著乳腺癌HER2三分類新時代的到來，HER2精準檢測的重要性日益顯著。而病理學家對HER2 IHC評分的判讀具有主觀性，當前亟需一種標準化的方法來確保HER2判讀的準確性和一致性。一項研究致力于評估病理學家在HER2 IHC評分上的一致性，并探討數(shù)字圖像分析（DIA）在輔助HER2低表達乳腺癌HER2 IHC判讀準確性方面的作用。研究結果顯示，盡管病理學家在評估HER2 IHC得分為0和1+的乳腺癌病例時表現(xiàn)出較高一致性，但DIA有望成為提升HER2 IHC評估標準化與量化水平的可靠輔助手段，特別是在面臨結果可能模糊不清的復雜病例（即得分為0-1+）時。這些發(fā)現(xiàn)為提升HER2檢測的準確性和一致性提供了新的契機。

研究方法

本研究檢索了2022年2月至8月期間，在本機構接受乳腺粗針穿刺活檢并診斷為浸潤性乳腺癌且HER2狀態(tài)呈陰性的病例，共計納入50例受試者。其中，HER2 IHC評分為0的受試者共25例，評分為1+的受試者共25例。所有活檢樣本均嚴格按照ASCO-CAP指南所制定的標本采集與固定時間進行處理。HER2 IHC染色采用4B5 HER2/neu抗體以及Ventana BenchMark Ultra自動免疫染色系統(tǒng)。

在研究過程中，六位乳腺病理學家對數(shù)字化掃描的全切片圖像進行了獨立評估，并給出HER2 IHC評分。初步評分完成后，在第二輪評分中，所有病理學家針對少于6位病理學家達成一致的病例進行線上討論，以使最終評分達成共識。

本研究采用了Aperio的膜算法v9.1，針對同一隊列的數(shù)字化掃描全切片圖像進行HER2 IHC染色評分。該算法能夠自動選定腫瘤區(qū)域，并量化單個腫瘤細胞的膜染色強度及完整性。DIA得分則根據(jù)細胞分類比例進行確定。如果>10%的細胞顯示3+染色，則評估DIA 3+得分；如果>10%的細胞顯示2+或更高染色，則分配DIA 2+得分；如果>10%的細胞顯示1+或更高染色，則評估DIA 1+得分；如果<10%的細胞顯示1+或更高染色，則分配DIA 0得分。

在統(tǒng)計分析方面，使用SPSS統(tǒng)計軟件中的Kendall一致性系數(shù)（W）統(tǒng)計測試評估病理學家之間的觀察者一致性以及病理學家評分與DIA結果之間的一致性。W值指示一致性水平：0.80-1.00表示極高的一致性；0.60-0.79，良好一致性；0.40-0.59，中等一致性；0.20-0.39，輕微一致性；0.00-0.19，較差一致性。

研究結果

HER2 IHC評分的觀察者間可重復性

在初步評分中，六位病理學家共評估了50個病例，其中25個病例原HER2 IHC得分為0，另外25個病例為1+。在得分為0的25個病例中，133個評分（88.7%）保持為0，17個評分（11.3%）變更為1+。在得分為1+的25個病例中，113個評分（75.3%）保持為1+，12個評分（8%）變更為0，25個評分（16.7%）提升至2+。

六位病理學家完全一致的評分出現(xiàn)在19個病例中（19/50，38%），包括17個原得分為0的病例（17/25，68%）和2個原得分為1+的病例（2/25，8%）。至少五位病理學家達成一致的評分出現(xiàn)在33個病例中（33/50，66%），包括18個原得分為0的病例（18/25，72%）和15個原得分為1+的病例（15/25，60%）。病理學家間整體一致性的Kendall W值為0.828，表明有極高的一致性。在第二輪評分中，對7個得分為0的病例和10個得分為1+的病例進行了重新評估，最終達成共識。

圖1. 50例浸潤性乳腺癌HER2免疫組織化學評分

圖2. 研究中包含的HER2免疫組織化學圖像示例（比例尺=200微米），A圖的評分為0（6位病理學家完全一致），B圖的評分為0（2位病理學家）或1+（4位病理學家），最終達成一致的評分為0，C圖的評分為1+（6位病理學家完全一致），D圖的評分為1+（3位病理學家）或2+（3位病理學家），最終達成一致的評分為1+（注意：數(shù)字圖像分析結果與所有達成共識的評分一致）

病理學家評分與DIA結果之間的一致性

采用DIA針對50個病例的數(shù)字化掃描全切片圖像進行了評分，其中49個病例完成了分析。在至少五位病理學家達成一致的病例中（17個得分為0的病例和15個得分為1+的病例），DIA評分與第一輪病理學家評分的一致性為100%。與病理學家最終評分相比，DIA評分與病理學家評分的一致性為96%（47/49）。在兩個不一致病例中，其中一個病例的病理學家評分為0，而DIA評分為1+（病例21），另一個病例的病理學家評分為1+，而DIA評分為0（病例25）。病理學家評分與DIA評分之間的一致性Kendall W值為0.959，同樣表明具有極高的一致性。

研究總結與思考

在本研究中，HER2初步評分結果顯示，在50個病例中，有19個病例（38%）獲得了全部6位病理學家的完全一致評分（6/6）。同時，在33個病例（66%）中，至少有5位或以上的病理學家（≥5/6）達成了一致評分，這些一致率相較于之前的研究報告有所提升。

本研究中所有觀察者均為專注于乳腺亞專科的病理學家，且均明確知曉本研究旨在明確IHC得分為0或1+的HER2陰性乳腺癌的情況，因此在每個病例中，評分標準得到了更為嚴格的應用。具體而言，在最初IHC得分為0的25個病例中，有68%（即17個病例）獲得了全部6位病理學家的完全一致評分，而有72%（即18個病例）獲得了至少5位病理學家的一致評分。相比之下，在最初得分為1+的25個病例中，僅有8%（即2個病例）獲得了全部6位病理學家的完全一致評分，而有60%（即15個病例）獲得了至少5位病理學家的一致評分。

對于IHC評分為1+的病例，評分的不一致性主要源于腫瘤細胞染色百分比（≤10%與>10%）和染色強度（微弱或幾乎不可見與弱至中等染色）的主觀判斷。在本研究的六位乳腺病理學家中，有一位病理學家傾向于給出比其他病理學家更高的評分，這進一步體現(xiàn)了人工評分系統(tǒng)所具有的主觀性。

值得注意的是，常用的HER2 IHC檢測并非為定量檢測蛋白表達水平而開發(fā)。鑒于這一局限性，目前正積極研究新技術，如定量免疫熒光測定法和免疫親和富集結合多重反應監(jiān)測-質譜（MRM），以期對HER2低表達乳腺癌提供更全面和準確的評估。盡管這些技術顯示出潛力，但其在臨床中的有效性仍需進一步驗證。目前，ASCO-CAP指南尚未建議改變HER2檢測算法。此外，基于DIA和人工智能的方法也被評估用于HER2 IHC輔助評分，并顯示出與病理學家評分的較高一致性。本研究的局限性在于病例數(shù)量有限，且僅包括HER2 IHC得分為0或1+的病例。未來需要更多研究來驗證DIA算法在更廣泛HER2 IHC評分中的應用前景。

參考文獻：

1.Sun H, Kang EY, Chen H, et al. Immunohistochemical assessment of HER2 low breast cancer: interobserver reproducibility and correlation with digital image analysis. Breast Cancer Res Treat. 2024 Jun;205(2):403-411.

審批編號：CN-155248 有效期至：2026-03-09
本材料由阿斯利康提供，僅供醫(yī)療衛(wèi)生專業(yè)人士參考

*“醫(yī)學界”力求所發(fā)表內(nèi)容專業(yè)、可靠，但不對內(nèi)容的準確性做出承諾；請相關各方在采用或以此作為決策依據(jù)時另行核查。