文獻概述

細胞療法，包括使用裝載腫瘤抗原的樹突狀細胞作為治療性癌癥疫苗，為惡性腫瘤患者提供了治療選擇。研究者在一項單臂I/II期臨床研究中評估了使用Wilms腫瘤蛋白（WT1）mRNA電穿孔自體樹突狀細胞（WT1-mRNA/DC）進行輔助疫苗接種的可行性、安全性、免疫原性和臨床活性，研究對象為接受標準治療的晚期實體瘤患者。Zwi N.Berneman等人發(fā)表在Journal ofHematology&Oncology上的文章報告了該研究結果，評估了晚期實體瘤患者接種WT1mRNA樹突狀細胞疫苗的可行性、安全性、免疫原性和臨床活性。

研究方法

本試驗納入40例預后不良的晚期腫瘤患者，包括13例膠質(zhì)母細胞瘤（Glioblastoma multiforme，GBM）、4例轉(zhuǎn)移性乳腺癌（Metastatic breast cancer，MBC）、10例惡性胸膜間皮瘤（Malignant pleural mesothelioma，MPM）、4例肉瘤或罕見腫瘤（腦干星形細胞瘤）。所有患者均患有轉(zhuǎn)移性或局部晚期疾病，并且根據(jù)現(xiàn)有的金標準至少接受過一次先前治療。

疫苗接種：將冷凍保存的疫苗（每次接種預期含有10×10?個樹突狀細胞）解凍后，皮內(nèi)注射在上臂內(nèi)側，距腋窩淋巴結大約5 - 10厘米。按計劃每兩周接種一次，持續(xù)6個月。根據(jù)具體臨床情況和疫苗供應情況考慮是否需要繼續(xù)進行疫苗接種。

免疫反應評估：在首次接種WT1-mRNA/DCs疫苗（V1）后的8周后（即T1時間點）的時間點進行遲發(fā)型超敏反應（DTH）皮膚試驗。免疫監(jiān)測在基線（PRE時間點，通常在V1）、V1后的8周（POST時間點，通常與DTH測試在同一天）以及預期治療階段結束時（FIN時間點）進行。采用流式細胞術直接對淋巴細胞亞群進行體外分析，對WT1特異性CD8?T淋巴細胞進行計數(shù)。采用胞內(nèi)細胞因子染色法檢測表達1型細胞因子IFN-γ和TNF-α和/或2型細胞因子IL-5的抗原特異性CD4?和CD8?T淋巴細胞。使用ELISA法測定血漿WT1 IgG濃度，使用四種WT1肽段作為捕獲抗原，將每種抗體陽性的臨界值設定為吸光度值0.15。

臨床反應評估：在接種疫苗前或開始時（V1）、T1（V1后8周）、T2（V1后6個月）進行評估，采用MRI或CT或PET-CT評估腫瘤情況。根據(jù)RECIST 1.1標準確定臨床反應。需評價總緩解率（完全/部分緩解患者的百分比）、疾病控制率（完全/部分緩解或穩(wěn)定患者的百分比）、中位總生存期（OS），并與文獻中預期的OS進行比較。

研究結果

療效：在時間點T1，疾病控制率和總有效率分別為64.1%和5.1%，在時間點T2，疾病控制率和總有效率分別為48.7%和12.8%。多形性膠質(zhì)母細胞瘤患者的中位總生存期（OS）為43.7個月。轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者為41.9個月，惡性胸膜間皮瘤患者為48.8個月，與先前報道的16.0個月、37.2個月和23.4個月的數(shù)據(jù)相比，均有優(yōu)勢。24/39例患者在T1和/或T2時觀察到病情穩(wěn)定（12/39例患者未接受任何伴隨治療），這可能解釋了OS方面觀察到的益處。與T1或T2未實現(xiàn)疾病控制相比，T1時病情穩(wěn)定，T2時病情得到控制，中位OS較長。所有達到部分或完全緩解的患者在WT1-mRNA/DC疫苗接種期間也接受了伴隨治療。（原發(fā)性腦腫瘤的療效數(shù)據(jù)見表1，表S1）

表1.按患者組劃分的臨床反應和總生存期

表S1.GBM隊列——個體患者特征及結果

免疫反應：除了1/38的測試患者（SOL36）有延遲型超敏反應。大多數(shù)患者在T1和/或T2時也表現(xiàn)出1型T淋巴細胞反應，包括對WT1的IFN-γ+和/或TNF-α+CD4+T淋巴細胞反應和IFN-γ+CD8+T淋巴細胞反應及對KLH的TNF-α+CD4+T淋巴細胞反應。大多數(shù)患者在基線時表現(xiàn)出抗原非特異性的2型T淋巴細胞（CTL）反應，這種反應不受WT1-mRNA/DC疫苗接種的持續(xù)影響，而抗原特異性的1型T淋巴細胞和CTL反應在WT1-mRNA/DC疫苗接種后在大多數(shù)病例中重新出現(xiàn)。

而疾病控制與1型細胞因子反應性相關。疾病控制與WT1或KLH特異性的淋巴細胞反應之間存在直接關聯(lián)。WT1特異性的IFN-γ+CD4+T淋巴細胞反應與OS直接相關。與先前報道的相同，抗原特異性1型CD4+和/或CD8+T淋巴細胞反應與臨床結果相關。研究還發(fā)現(xiàn)WT1-mRNA/DC疫苗誘導的整體免疫反應具有一定程度的同步性。

該研究的早期臨床研究已經(jīng)證明了WT1-mRNA/DC疫苗在各種實體腫瘤患者中的安全性、可行性、1型免疫原性和臨床活性，并表明對OS有潛在的有益影響。抗原特異性1型T淋巴細胞反應與臨床結果（疾病控制和OS）相關。由于該研究是在預先選擇的一組患者中進行的，因此需要進一步的臨床研究來確認WT1-mRNA/DC的臨床療效。