支原體污染一直是細胞培養的一顆「定時炸彈」，由于前期發生時較難被觀測，往往在發現時就已經來不及了。這次小王的實驗室又遇到了支原體感染危機，他不斷復盤試圖找到真正原因：

這么貴的細胞，也是正規渠道購買！收到的「心肝寶貝」肯定不會有污染！

嚴格執行「無菌操作」，多樣本處理也做好了隔離和標記，不存在交叉污染！

那就可能是……細胞培養基/血清被污染了！

經過排查，這次感染的「罪魁禍首」，居然是這次培養使用的血清中含有支原體。那如何才能防范培養基/血清源頭發生的支原體污染呢？如何選擇高質量血清/培養基？本文整理 3 點容易被忽視因素，祝大家實驗順利。同時，我們還準備了有獎調研，點擊此處參與或文末完成問卷，即有機會贏折疊燒水壺、定制衛衣、京東卡等150 份驚喜好禮！

細胞培養中，細胞培養基應用成分、培養基 pH 值、培養條件等都影響著細胞培養的效果。

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關注血清質量

血清為細胞生長提供必需的基本營養物質、激素和各種生長因子，以及結合蛋白等物質維持細胞生存環境，促進細胞生長，保護細胞。當前市售血清各種各樣，選擇合適的血清對于保證細胞生長狀態至關重要。血清中蛋白含量是非常重要的指標，其中，球蛋白含量是重要的指標，含量越低，血清質量越高；血紅蛋白也是越低越好。雖然血紅蛋白含量高低可能不直接影響血清質量，但其體現著采血過程的嚴謹規范程度，有助于篩選合適的高質量、質量穩定的血清。

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避免各種微生物及支原體污染

在細胞培養過程中，容易影響細胞生長而又很容易忽視的就是支原體的污染。支原體是微小的生物，需要通過 0.1 um 孔徑的濾膜去除。支原體、病毒的污染在顯微鏡下也難以觀察，但會影響細胞生長，會嚴重影響實驗結果。高質量的血清/細胞培養基產品多是通過 0.1 um 的濾膜過濾，在細胞培養基準備過程中去除支原體污染。常用的賽默飛 Nalgene 0.1 um 無菌過濾裝置，被稱為降低細胞培養污染的最后一道防線。

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選擇高質量血清/培養基

血清的促生長效果，也就是通過培養細胞來驗證，適合所用細胞系生長的血清才是最合適的。

對于血清選擇來說，血清的來源是一個首要篩選因素，受飼養環境及生產工藝影響，一般原產澳洲或新西蘭的血清品質較好。其次看血清的外觀，高質量的胎牛血清呈黃色或紅色，蛋白和脂類物質含量低，表現為稀薄、清亮，而新生牛血清相對粘稠，顏色略深。而偶爾會見到的血清沉淀物跟生產工藝相關，除對細胞顯微觀察會有影響外，基本不影響細胞生長。

在這里有個竅門分享給大家：血清/細胞培養基選擇過程中，也可以直接通過產品的外在包裝等評估其價值。如老話所說「好馬配好鞍」，高品質的血清/細胞培養基等為了保證產品質量穩定，多選擇高質量的包裝瓶產品，如血清瓶上的「Nalgene」標志。Nalgene 血清瓶，以其美國藥典 VI 標準、無細胞毒性、通過嚴格的防漏認證、高氣體阻隔作用聞名業界，是血清/細胞培養基等 pH 敏感樣品的理想容器。

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內容策劃：鄒禮平

內容審核：吳軍

題圖來源：圖蟲創意