昨天那一篇簡要的講了CD3抗體對于雙抗藥物的重要性。

談到雙抗藥物管線時，各種話題通常聚焦在藥物靶向的腫瘤靶點（CD19/BCMA等），而忽略了CD3抗體的作用。

雖然CD3抗體對雙抗藥物具有重大影響，但少有研究對這種影響做系統性的闡述。 今天介紹一篇基于 TCR藥物的 CD3抗體 相關研究， 該研究利用ImmTAC技術，把 一系列不同親和力活性的CD3抗體和 TCR 組合成不同TCR藥物 ，并做了系統的研究 。

1、CD3抗體和不同TCR親和力的設計

研究團隊基于親本CD3的scFv抗體（E0，KD=33.9 nM） 通過定點丙氨酸誘變產生一系列親和力較弱的突變體，通過噬菌體展示的親和力成熟用于產生具有更強親和力的變體。

另外，通過改變HLA-肽的序列，能夠使用相同的ImmTAC分子來測試從uM到pM級別的一系列TCR親和力。

2、CD3抗體的解離時間比親和力更重要

用不同親和力的CD3抗體去激活T細胞，并通過IFNγ的釋放來作為T細胞激活的指標，結果發現CD3抗體的親和力 和IFNγ釋放沒有直接關系。

CD3結合最弱的變體（E8和E39）具有較低的細胞因子釋放，而中等親和力變體，尤其是E28，具有最高的細胞因子釋放。 強結合變體（E16、E17、E24和 E42）的細胞因子釋放量非常低。

E28和E0突變體對CD3的親和力非常相似（36 VS 34nM），但E28具有更快的解離速率（t1/2 為4.6分鐘，而E0為7.6 分鐘），同時IFNγ的釋放高于E0。

類似的E8和E39的親和力也相似（615 VS 607 nM），但E8的解離速率較慢（t1/2為0.6分鐘，而E39為0.2分鐘）并且IFNγ釋放低于E39。

上述研究表明CD3抗體的off-rate是比單獨親和力更有用的T細胞激活預測指標。

3、最佳的抗CD3親和力取決于TCR-pHLA 親和力

研究人員設計了一系列MHC肽，它們與TCR的親和力范圍為KD=1.8 nM~500 μM。

同時用 四種CD3抗體組裝TCR藥物，這四種CD3抗體的結合包括強（E42）、弱（E8）和中度（E0 和E28），并用這四種TCR藥物誘導T細胞對腫瘤的殺傷。

結果發現，較低親和力的TCR的親和力增加了E42 TCR藥物的細胞因子釋放，同時降低了E0、E28和E8 TCR藥物的細胞因子釋放。

當TCR親和力減弱至87 nM（MimC）時，E42的性能顯著優于其他變體， 對于 1-2 μM（MimF 和MimG）的較弱的TCR親和力也是如此。E42的TCR親和力較低，形成免疫突觸的時間（Bridging T1/2）。

當TCR親和力到 MimH 的 66 μM 或 MimI的 567 μM 時，任何 抗 CD3 變體均未觀察到活性，表明在這種情況下TCR藥物的設計是無效的 。

CD3和靶向抗體之間的協調，必須精心的進行篩選！

4、寫在最后

為了設計有效的 雙抗，必須選擇合適的CD3抗體，最大限度的激活T細胞而不引起細胞因子風暴，同時要考慮其和靶向腫瘤細胞的抗體的協調，而且兩者這間的協調作用必須經過“縝密”的篩選。