前言

雙抗的原理已經寫過很多了，通過靶向T細胞的CD3蛋白和腫瘤細胞的抗原，形成免疫突觸，使得T細胞殺傷腫瘤細胞。相關知識參考我們之前的文章 。

那么問題來了，不同類型的雙抗、不同靶點的雙抗都含有CD3抗體結構，那這個CD3抗體結構是隨便弄一個就可以的么？

答案顯然是否定，今天這篇就來看看CD3在雙抗設計中“吊詭”的地方！

01

CD3抗體的“好和壞”

根據經典理論，T細胞激活需要兩個信號：信號一來自TCR的刺激，是決定T細胞抗原特異性的主要信號；信號二來自共刺激分子，它們控制激活的強度和結果。

但是在雙抗中，靶向CD3的抗體可以直接激活TCR信號，繞過TCR-MHC相互作用，同時不需要共刺激信號，這都歸功于CD3抗體的作用， 因此， CD3的親和力越大TCR的活化水平就越高。

CD3結合也是有代價的，這其中首先是T細胞相關的神經毒性和細胞因子釋放綜合征（CRS）。由于CD3可以無差別的活化體內T細胞，所以雙抗引起CRS的風險和概率在理論上更大。

這體現在臨床雙抗藥物劑量設計的復雜性中，雖然增加劑量會提高療效，但限制性毒性劑量很容易達到，限制了雙抗在老年和體弱患者中的使用。這個知識點在我們之前的文章 寫過。

第二，親和力過高還會影響雙抗藥物的組織分布。給藥后，使得藥物優先分布到富含T細胞的組織，同時也限制了到達腫瘤組織的劑量。對應的， 與靶抗原的相對親和力 較高的雙抗 優先與腫瘤 細胞結合。

綜上，理想的雙抗設計，其CD3抗體應能誘導T細胞足夠的細胞毒性，而不引起細胞因子的過度產生。幸運的是，對于T細胞來說，細胞毒性的激活閾值遠低于細胞因子產生的激活閾值。

02

CD3結合位點的選擇

CD3分子上的特異性結合位點也會影響T細胞的激活。CD3是TCR/CD3 復合物的一部分，由γ、δ、ε和ζ亞基組成。

目前，大多數雙抗藥物的CD3抗體主要與CD3ε單位結合，但也有公司開發了與CD3εδ異二聚體結合的抗體，他們的研究數據認為這種CD3抗體使得T細胞保留了顯著的細胞毒性的同時，細胞因子產生水平降低。

03

倍利妥(Blinatumomab)：優秀雙抗藥物設計的榜樣

多年來，Blinatumomab一直是唯一獲FDA批準的雙抗（現在不是了）。期間許多其他同類雙抗也一直在開發中，但這些藥物大多缺乏有效的藥效作用，這也側面體現了Blinatumomab藥物設計的優秀性。

Blinatumomab的結構是甘氨酸/絲氨酸（G4S）Linker連接的兩個scFv（一個靶向CD3，另一個靶向CD19）構成。

其設計的獨特的地方是其對CD3和CD19的親和力達到了最佳平衡。對靶抗原CD19的親和力較高，Kd約為10^-9M，這是典型抗體的Kd值；而對CD3的親和力較低，Kd約為2.6×10^-7M，略高于典型TCR與MHC結合的親和力。

憑借對靶細胞和T細胞的“平衡”親和力，Blinatumomab給藥后會優先分布到靶細胞表面，隨后其抗CD3結構再輕松的和T細胞交聯并激活TCR復合物。

此外，合理的CD3親和力，避免了T細胞和腫瘤細胞長時間的相互作用，從而釋放完成工作的T細胞去殺掉下一個目標，這種獨特設計將T細胞變成能殺死多個靶細胞的“連環殺手”。

補充一點額外知識，Blinatumomab 是基于“BiTE”平臺構建的小型單鏈雙特異性抗體。它的小尺寸和兩個結合域之間的靈活性，使得T細胞和靶細胞非常接近，加速了免疫突觸形成，最終導致 TCR 的強烈激活，同時，T細胞與靶細胞間的短距離也使得穿孔素和顆粒酶B能夠有效地遞送到靶細胞中，從而提高靶標殺傷效率。

04

雙抗是火了，但不是誰家有雙抗誰就能火的！

今天限于篇幅只是大體寫了CD3抗體相關的考量，還有臨床、CMC以及監管等角度的技術問題，都是非常需要技術積累和研發水平的！厚積薄發！