?近年來，隨著外泌體的研究熱度持續升溫，關于外泌體在不同領域的論文報道層出不窮，外泌體的臨床應用也涌現出很多的成功案例，不斷有基于外泌體技術的產品問世。

?盡管越來越多的科研實驗證實外泌體用于臨床應用的有效性，但如何穩定保存外泌體、怎樣可以不喪失其功能性顯得尤為重要，甚至成為了評判一款外泌體產品優劣的關鍵性因素。

?在常規的實驗中，對于外泌體的存儲條件一般是4℃、-20℃、-80℃。盡管已有一些研究表明不同的儲存條件對外泌體的功能存在影響，但外泌體的保存條件的標準仍未定義有統一定論。

?為此，上海交通大學研究了不同溫度、pH和凍融次數等儲存條件對外泌體的數量變化與細胞攝取的影響，并將其與新鮮的外泌體進行比較，最終在2019年4月Protein & Cell雜志上發表了相關論文報道。

?研究人員將提取到的外泌體等分成若干等分，每個部分在不同溫度（-80℃， -20℃，4℃，37℃和60℃）下進行儲存，或者通過1-5個循環冷凍至-80℃并解凍。等到24小時后，再進行NTA和WB檢測外泌體的剩余量。

（A）通過NTA檢測在不同溫度下儲存了24小時的外泌體的相對濃度

（B）在樣品通過不同條件下儲存24小時后，再通過WB檢測三種外泌體標記物TSG101，HSP70和ALIX的水平

?在(A)(B)兩圖的實驗結果顯示，在4℃下儲存的外泌體具有最高濃度。

（C）外泌體在儲存于?80 °C，?20 °C，以及4 °C 下，0、7、15以及30天后，再通過WB檢測三種外泌體標記物TSG101，HSP70和ALIX的水平

?在（C）圖的實驗研究中檢測了不同溫度（-80℃，-20℃，4℃）下長期儲存的外泌體相關蛋白的水平。TSG101、HSP70和ALIX的水平隨著儲存時間延長而顯出下降趨勢，在-20℃和4℃的降解速度要大于-80℃下的蛋白降解速度。

?研究證實，在4℃下放一個月，外泌體的標記蛋白幾乎完全降解，活性全無。

（D）不同的凍存次數下外泌體標記物TSG101、HSP70和ALIX的水平

?（D）圖的實驗研究表明反復的凍融會造成外泌體標記物水平的降低，可能的機制是其造成了膜的破壞。

?該實驗結果顯示，在-20℃和-70℃下保存的外泌體會比較完整無損，而4℃和室溫下的外泌體已基本沒有活性。疊加長期存儲條件的現實因素，-20℃是比較可取的外泌體存儲方式。

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